免费看污又色又爽又黄又脏小说,天堂在\/线中文官网,宝贝胸罩脱了让我揉你的胸,国产精品久久久亚洲

產(chǎn)品展廳收藏該商鋪

您好 登錄 注冊(cè)

當(dāng)前位置:
上海古朵生物科技有限公司>技術(shù)文章>關(guān)于膠回收的一些心得體會(huì)

技術(shù)文章

關(guān)于膠回收的一些心得體會(huì)

閱讀:312          發(fā)布時(shí)間:2021-11-10

1、提高膠回收量的技巧
1) 增加電泳時(shí)的上樣量。
2) 電泳緩沖液用新鮮配制的。
3) 切膠時(shí)盡量只切有條帶的膠,減小切膠體積:含目的片斷很少的膠就不要要了,不然影響回收率。
4) 把切的兩塊或多塊膠融化后,無(wú)論多大的體積都用一個(gè)管子,轉(zhuǎn)移到同一個(gè)柱子上。
5) 溶膠時(shí)所加的溶液可多一點(diǎn),這樣更有利于DNA與膜的結(jié)合,不過(guò)一般不要多余750ul。
6) 膠回收的關(guān)鍵是通過(guò)柱子的溶液的鹽濃度、酸堿性(電荷)和疏水性使DNA與柱子結(jié)合。因此,若電泳緩沖液的PH偏高,可在溶膠液中加入10ul(PH 5.0,3mol/L的 NaAC);為了使DNA分子更好的攔截在膜上,可以添加30%異丙醇在加熱溶解膠后的液體里。
7) 加洗脫液之前,將柱子在室溫放置幾分鐘(大約需10分鐘),以使乙醇充分揮發(fā)。
8) 最后少加些洗脫液,盡量減少回收體積,一般用30-50μl洗脫液洗脫(不能太少,否則無(wú)法浸濕膜反而不利于洗脫);洗脫液滴在膜中央,以充分洗脫結(jié)合在膜上的DNA。
9) 可以在加入洗脫液之后,可以在55度水浴5分鐘或放在50度水浴10分鐘以上再洗脫,或用封口膜密封4度過(guò)夜,第二天再離心回收,效果不錯(cuò)。
10) 將離心后的洗脫液加回吸附柱,再次離心。

2、PCR 產(chǎn)物回收的詳細(xì)方法和步驟
1) 普通膠回收
如果要膠回收,最好還是用試劑盒,方便,回收率也略高,實(shí)在要手工回收,可以切膠后加入3倍體積TE,水浴熔化后,酚、酚/lv仿抽提干凈,乙醇沉淀即可。

2) 從低熔點(diǎn)凝膠回收DNA
純化DNA--pian段 加與凝膠體積相等的TE(10mmol/l Tris-HCl pH8.0,0.1mmol/l EDTA ),置65℃水浴5分鐘保溫,使凝膠*溶解。
待放至室溫,加等量酚(TE飽和,TE封在上層,取下層酚),輕輕混勻(不用混勻),12000rpm,3分鐘離心。反復(fù)1-2次。
取上層液,加0.1體積3mol/L醋酸鈉(pH5.2)和2.5倍體積無(wú)水乙醇,進(jìn)行乙醇沉淀。將純化的DNA加適量TE溶解,測(cè)定含量,備用(可用于目的基因結(jié)構(gòu)分析,探針制備等)。

3) 擴(kuò)增特異性好的PCR回收
如果PCR擴(kuò)增特異性好,只是簡(jiǎn)單的PCR產(chǎn)物純化回收,可以在PCR產(chǎn)物中加入50ug/ml 的蛋白酶K,37度1h,酚/lv仿抽提一次,lv仿抽提一次,上清加入0.1體積的醋酸鈉,2.5體積的無(wú)水乙醇沉淀回收。

收藏該商鋪

請(qǐng) 登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
二維碼

掃一掃訪問(wèn)手機(jī)商鋪
在線留言
含着奶头搓揉深深挺进| 超h公用妓女精便器系列小说| 国产片xxxxa片国语对白| 伊人久99久女女视频精品免| 宝贝你的小缝好紧好滑| 无码爽大片日本无码aaa特黄| 强壮公弄得我次次高潮厨房| 无码人妻丰满熟妇区五十路百度| 古代翁妇乱高h辣文| 国产亚洲精品无码成人| 国产麻传媒精品国产av| 无码人妻久久一区二区三区不卡| 六十路垂乳熟年交尾| 张开腿让我尿在里面(h)| 色噜噜狠狠一区二区三区| 糖心VLOG精品一区二区| 真人做爰45分钟| a级毛片无码免费久久真人软件| 95免费视频在线观看| 高清无码在线观看| 亚洲和欧洲一码二码区别在| 丰满女邻居的嫩苞张开视频| 精品无码久久久久久国产| 与亲女洗澡时伦了视频| 性少妇jealousvue成熟| 特区爱奴在线观看| 一区二区亚洲av天堂嫩模| 国产精品久久久久久久久免费| 真人无遮挡猛进猛出视频| 人妻互换共享4p闺蜜疯狂互换| 777奇米影视| 一边摸一边叫床一边爽| 把老熟妇日出白浆| 国产日韩未满十八禁止在线观看| 丰满人妻被黑人猛烈进入| 老宋翁熄高潮怀孕| 久久久精品国产sm调教网站| 又白又大的奶头a片免费| 亚洲日韩av无码中文字幕美国| 国产又黄又爽又猛免费视频播放| 真人性囗交69图片|